MDA-PCA-2B 人前列腺癌細胞
Catalogue No.: C1292
Product Format: a T25 flask
Culture Properties☁·₪☁│:貼壁
Complete Growth Medium: H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
Item | Specifications |
a T25 flask | 2X106 |
Manual | 1 copy |
Operation steps for cell culture
吸走多餘培養基╃╃▩•₪,加入3-5mL PBS後輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
吸乾淨PBS後加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA╃╃▩•₪,輕輕搖晃培養皿使胰-酶浸沒細胞表面╃╃▩•₪,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對於消化比較敏感╃╃▩•₪,消化過度會嚴重影響細胞狀態╃╃▩•₪,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代後不長₪│。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落╃╃▩•₪,可以輕輕吹下時即可終止╃╃▩•₪,禁止消化到細胞漂浮₪│。混勻細胞時儘量輕柔╃╃▩•₪,不要吹出大量氣泡₪│。)
加入6-8ml培養基終止消化╃╃▩•₪,輕輕吹下細胞混勻;
將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min╃╃▩•₪,棄上清╃╃▩•₪,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養(建議T25瓶加10-12ml完培養基╃╃▩•₪,10cm皿加12-15ml);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一╃╃▩•₪,具體傳代比例視細胞生長速度而定╃╃▩•₪,大部分細胞適用1:3-1:4傳代╃╃▩•₪,生長較慢的細胞可以1:2傳代₪│。
Cell cryopreservation
1.凍存液☁·₪☁│:92%完培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟☁·₪☁│:4度10min╃╃▩•₪,-20度2h╃╃▩•₪,-80過夜後液氮儲存₪│。
Tips☁·₪☁│:
1. 細胞經過運輸後╃╃▩•₪,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰撞破碎形成碎片╃╃▩•₪,是正常現象₪│。貼壁細胞可以消化╃╃▩•₪,懸浮細胞直接混勻收集細胞╃╃▩•₪,900-1000rpm(約150g)離心3min╃╃▩•₪,棄上清₪│。加5ml PBS重懸細胞╃╃▩•₪,再900-1000rpm(約150g)離心3min╃╃▩•₪,用新鮮的培養基重懸接種到新的培養瓶₪│。第二次PBS重懸是為了去除碎片╃╃▩•₪,如果平時碎片比較少╃╃▩•₪,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多╃╃▩•₪,建議PBS多洗幾次₪│。
2. 細胞生長不均時╃╃▩•₪,可以將細胞消化吹散後加入新的培養基重新接種或傳代₪│。
3. 細胞生長緩慢時╃╃▩•₪,可以選擇提高血清濃度培養(最高不超過20%)╃╃▩•₪,也可以根據細胞生長狀態╃╃▩•₪,選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養₪│。
4. 不同細胞貼壁性差異比較大╃╃▩•₪,所以消化時間差別較大╃╃▩•₪,20s-10min均有可能╃╃▩•₪,具體以細胞消化到相互分離但未脫落╃╃▩•₪,並可以輕輕吹下為準╃╃▩•₪,嚴禁消化到細胞漂浮₪│。客戶消化過度導致細胞死亡↟✘│、漂浮↟✘│、生長緩慢╃╃▩•₪,不提供免費售後服務₪│。
5. 乾冰發貨均為兩支╃╃▩•₪,客戶先復甦一支╃╃▩•₪,若復甦失敗及時聯絡我方並在我方指導下復甦第二支₪│。若客戶同時復甦兩支均狀態不佳╃╃▩•₪,我方不提供免費售後服務₪│。
6. 細胞狀態正常時╃╃▩•₪,應儘快凍存細胞保種╃╃▩•₪,凍存後應隨機抽取一支檢測凍存效果₪│。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責╃╃▩•₪,客戶凍存細胞死亡不提供免費售後服務₪│。
7. 建議使用本庫原裝培養體系培養細胞╃╃▩•₪,其他品牌培養基及血清培養效果無法保證╃╃▩•₪,培養出現異常不予售後₪│。
Notice☁·₪☁│:
客戶收到MDA-PCA-2B 人前列腺癌細胞有任何疑問請及時致電我們╃╃▩•₪,細胞收到後1周內沒有任何電話╃╃▩•₪,或其他形式回訪╃╃▩•₪,預設為細胞質量沒問題╃╃▩•₪,之後出了任何問題不給予免費售後₪│。細胞免費售後只提供一次╃╃▩•₪,若重發後再次培養死亡不再免費補發╃╃▩•₪,細胞收貨時已經死亡或密度不足的除外₪│。